1 材料与方法
1.1 试验地点
内蒙古扎赉诺尔达达有限公司
1.2 试验动物
在2005年9月—2006年11月期间, 试验所用样本, 母鹿为健康、饲养管理正常且在8月20日前断乳的可繁殖新疆阿尔泰马鹿母鹿, 年龄在4～10岁。共选择50只。
1.3 试验试剂
PMSG:1 000 IU/支, 天津市正江科技有限公司产, 批号 20050607。
CIDR:20支/包, 新西兰哈密尔顿生物公司产。
促排3号 (LRH-A3) :0.15 mg/支, 宁波市激素制品有限公司, 批号20040710。
鹿眠宝:2 mL/支, 100 mg/mL, 东北农业大学外科教研室产, 批号20020126。
鹿醒宝:2 mL/支, 3 mg/mL , 东北农业大学外科教研室产, 批号20020126。
米尼图稀释液浓缩液:200 mL/瓶, 德国米尼图公司生产。
1.4 主要仪器和设备
吹管、植栓器、输精枪、飞针管、生物显微镜、血球计数器、血球计数板、低温平衡柜、载玻片、盖玻片、5 mL注射器、0.25 mL细管。B-型超声波影像诊断仪:AMI-900型兽用B超, 5.0MHZ直肠线阵探头。
1.5 同期发情方法
通常, 在马鹿发情配种期, 即在9月末分批次对试验母鹿采取麻醉保定, 发情周期任一天放入CIDR, 打解药使其苏醒。在第13天时对试验母鹿采取麻醉保定, 取CIDR, 同时肌注PMSG 400～800 IU/头, 即CIDR+PMSG。撤栓后打解药使其苏醒。撤栓后48 h开始观察发情;试验是在9月初, 即在繁殖季节前期, 采用埋8 d, 取CIDR, 同时肌注PMSG 600～1 000 IU/头, 进行诱导发情。
1.6 发情鉴定方法
在每天24 h不间断专人观察发情, 并每隔2 h, 分别将有包皮炎的公鹿放入母鹿圈, 以母鹿接受爬跨为准, 母鹿站立不动为主要发情标志。然后记号将其拨入旁边的空圈内, 等待输精。每次1 h。对有求偶表现, 但发情表现不明显, 不接受公鹿爬跨的个别母鹿, 应在输精时直肠触摸卵巢判定母鹿是否发情。
1.7 输精时间
采用三种不同的输精时间, 一是在撤拴后48～50 h输精, 同时肌注促排卵激素, 在撤拴后60～62 h再输精一次;二是在撤拴后定时输精一次, 同时肌注促排卵激素;三是在母鹿接受爬跨后定时输精, 同时肌注促排卵激素。
1.8 人工输精方法
输精前, 先将母鹿采取化学保定, 输精方法均采用直肠把握输精法。输精员戴上直检手套蘸上清水作润滑将手插入母鹿直肠, 掏净直肠中的宿粪, 隔着肠壁把子宫颈轻轻固定在手中, 手臂往下按压使阴门开张, 另一手把装好精液的输精器, 自阴门向斜上方徐徐插入以避开尿道口, 再平插或稍向斜下方插入。两手配合将输精器徐徐越过子宫颈口内的皱壁缓慢旋转送至子宫内, 在子宫颈与子宫体结合处缓慢注入精液, 实在无法全部通过子宫颈就将精液输在子宫颈内, 待拉出输精器后, 再将直肠内的手退出, 完成人工授精。输精完毕用鹿醒宝肌肉注射使母鹿苏醒。
1.9 妊娠的诊断
妊娠诊断在母鹿人工输精后的第60天利用B超直肠线阵探头检查, 探头频率为5.0MHz 。
判定标准:出现圆形或椭圆形的一个或数个规则的无回声暗区, 判为可疑;如果无回声暗区出现胚囊、胚体, 则判为阳性;如无上述无回声暗区, 判为阴性。暗区形状不规则或者暗区内有散在的等回声光点 (光斑) 者为子宫积液。可疑及阴性者择日重检, 阳性准确率以产仔数为准 (包括流产) 。利用该方法进行早期妊娠诊断, 能够观察到胚囊、胚体、胎心博动、胎动和胎盘等怀孕特征, 阳性准确率可达100%。
2 结果
2.1 繁殖季节前期CIDR诱导发情效果
采用X2检验 ( 2×2因子) 进行统计分析表明, 年处理母鹿发情效果上差异不显著 (P>0.05 ) , 均能达到较好的诱导同期发情效果;采用X2检验 ( 3×4因子) 进行统计分析表明, 发情时间分布上差异不显著 (P>0.05 ) 。从表1可以看出, 在繁殖季节前期, CIDR的同期发情效果稳定。
2.2 繁殖季节前期诱导发情与自然发情受胎率双羔率的比较 (表2)
采用X2检验 (3×2因子) 对母鹿受胎效果进行统计分析表明, 3组的受胎效果及两两之间的受胎效果均差异不显著 (P>0.05 ) 。说明诱导发情方法均能达到自然发情母鹿的人工授精效果, 两组诱导发情的受胎率分别为79.1%和78.3%。并且从表2还可以看出采用诱导发情后人工输精的母鹿, 母鹿双羔率明显高于自然发情人工输精的双羔率 (P<0.05) , 3组双羔率分别是11.8%、13.9%、0%;诱导发情的两组双羔率差异不显著 (P>0.05) 。
2.3 不同PMSG的量对母鹿发情受胎的影响 (表3)
采用X2检验 (3×2因子) 对不同PMSG的量对母鹿发情受胎的影响效果进行统计分析表明, 这三个PMSG水平的发情受胎效果差异显著 (P<0.05) 。两两分析表明800 IU组在同期率和受胎率上与其它两组均差异不显著 (P>0.05) 。而600 IU和1 000IU组在同期率和受胎率上差异均显著 (P<0.05 ) , 在同期率上1 000IU高于600IU组, 分别是100.0% (50/50) 、92.0% (46/50) ;在受胎率上1 000IU低于600IU组, 分别是58.0% (29/50) 、80.4% (37/46) 。
3 讨论
试验利用进口CIDR+PMSG对母鹿进行同期发情处理, 撤栓24 h后, 开始放入试情公鹿对母鹿进行试情, 均以接受爬跨视为发情。对发情母鹿发情后6～8 h、10～12 h、14～16 h进行直肠把握子宫内输精的结果进行统计, 得出同期发情母鹿在发情后6～8 h输精的受胎率显著高于其它两组 (P<0.05 ) 。
在繁殖季节前期, 诱导发情可以使母鹿提早配种, 能够达到繁殖季节里自然发情受胎效果。由于在繁殖季节前期, 母鹿可提早配种, 使产仔季节提前, 有利于幼鹿的生长和产后母鹿的体况恢复, 对翌年的母鹿发情配种工作十分有利。
自然发情和同期发情的母鹿发情后排卵的时间不相同, 自然发情母鹿其最佳输精时间是在发情后10～12 h, 同期发情母鹿其最佳输精时间是在发情后6～8 h, 一次定时输精在撤栓后55～57 h输精受胎率最高。二次定时输精和同期发情试情后6～8 h输精均好于一次定时输精, 二次定时输精和同期发情试情输精两者之间无差别, 都能达到很好的效果。
4 结语
养鹿业是畜牧产业中较年轻的养殖行业, 养鹿业历来是一项高效益产业, 特别是对于我国这样一个生产力水平较为落后, 农村人口占绝大多数的发展中国家, 更是东北、西北农区、牧区和山区人民脱贫致富的门路。
但最近几年, 由于一些国家养鹿业的兴起, 如新西兰利用先进的畜牧业管理与技术, 很快的提高了鹿茸的产茸量, 造成了鹿茸价格的大幅的下滑, 从而影响了我国养鹿户的经济效益和养鹿的积极性。
要想解决目前的养鹿业所面临的问题, 就要借助先进的畜牧生物技术, 走良种化的发展道路, 尽快的提高我国茸鹿的单产, 降低养鹿业成本。
摘要：试验用C IDR+PMSG法对马鹿在繁殖季节前期进行同期发情处理, 采用人工输精方式配种, 统计发情只数、妊娠数、产仔数。结果表明, 共50多只马鹿进行同期发情试验, 2005年同期发情率为84.3%, 2006年同期发情率为88.5%。妊娠率分别为79.1%和78.3%。结果显示, 在繁殖季节前期, C IDR+PMSG法的同期发情效果稳定。
关键词：CIDR,马鹿,同期发情