安定是一种使用广泛的二氮杂卓类抗焦虑药物, 主要治疗官能病症, 能治疗患者焦躁、癫痫等症状。但由于该药物具有成瘾性, 且会不易被代谢出体外, 因此长期或过量服用出现中毒情况。目前关于安定含量的检测分析方式大多需要依赖专门的检测仪器。这类仪器的价格昂贵, 操作复杂, 并不能很好的在实际生活中得到应用。为提升安定含量检测方式的操作性和公共性, 故采用紫外分光光度方式进行测量, 并探究出一套简单易操作的检测方式。
1 安定的概况
安眠药的又称为安定, 也叫做地西泮, 是白色或类白色结晶性粉末, 无明显气味, 味道微苦[1]。目前市面上所用的安眠药属于苯二氮杂卓类药物, 能很好的诱导患者入睡, 延长睡眠时间并提升睡眠质量。安定是临床广泛使用的一种镇静药物, 具有很好的催眠、抗癫痫、抗焦虑及中枢性肌肉松弛的作用。该药的药理是通过在大脑边缘系统发生作用, 与中枢系统中的苯二氯卓受体进行有效结合, 进而促进Υ-氨基丁酸释放或与突出传递的功效, 最终实现诱导患儿进入睡眠或镇静下来的目的[2]。安定的治疗效果非常理想, 且对呼吸系统和肝酶的影响比较小, 即便是使用的剂量比较大, 也不会产生麻醉药剂的特点。但安定药物经肝脏分解后所产生的代谢物很难排除体外, 并且具有生物活性, 仍会继续发挥药效。长此以往, 必然会造成极大的副作用, 出现药物中毒的情况。
目前安定检测的技术主要有气相色谱法、高效液相色谱法、液质联用法、气质联用法、, 酶联免疫法、薄层色谱法、高效毛细管电泳法、胶束电动毛细管色谱法和流动注射光度分析法等。但这些方法均需要依赖各种专业的仪器, 且所检测样品也需要经过提纯、纯化、衍生化生步骤, 如此不仅加大安眠药中毒样品中安定含量检测的成本, 其复杂的流程也需要耗费大量的时间。这非常不适用需要尽快得出检测结果的情况, 这也是局限安定检测方式普及的重要原因。
2 安眠药中毒样品中安定含量的检测
2.1 实验材料
实验仪器:UV-120-02型岛津紫外-可见分光光度计和1厘米的石英比色杯;
实验试剂:准备3mol/升的磷酸盐溶液;称取41.4g磷酸二氢钠并加入水溶解至100毫升, 所获得试剂待用;准备好乙醚或三氯甲烷的试剂;0.45mol/升氢氧化钠;在1.8g的氢氧化钠中加水溶解至100毫升;2mol/升盐酸;安定溶液 (按标准为20μg/毫升, 可从市场上买到安定片在用水兑成标准溶液) 。
2.2 实验方法
实验的原理是依据安定的浓度是在2~20μg/毫升内, 且242nm和263nm处的光密度差值与安定浓度是呈正比关系的。
实验步骤如下: (1) 取胃液0.5毫升加水溶解至5毫升, 或其他样品5g或5毫升, 加入0.45mol/升氢氧化钠, 使样品的PH值为中性;依次加入0.25毫升的3mol/升的磷酸盐溶液和30毫升的三滤甲烷 (或乙醇) , 振动摇匀;如果是胃液则要分出三氯甲烷, 如果使用的样品则需要再加入10毫升的三氯甲烷, 摇匀后再次分出三氯甲烷, 将分出的三氯甲烷溶液合并在一起[3];
(2) 使用10毫升的0.45mol/升氢氧化钠溶液洗涤三氯甲烷溶液, 一次即可;
(3) 将三氯甲烷通过干燥的滤纸, 滤入蒸发皿中, 等待挥干即可;如果使用的是乙醇, 则需要使用无水的硫酸钠脱水后, 再进行挥干;
(4) 将样品的残留物使用10毫升的正己烷溶解, 随后在用10毫升的2mol/升的盐酸溶液反提取, 所得到提取也放入1厘米的石英比色杯中, 放置在紫外分光光度计中进行测定;将2mol/升盐酸作为参数对比, 并详细记录其在242nm和263nm出的光密度;在另一份空白的检查材料中加入5毫升的安定标准液作为对照物, 该检查材料在此进行操作, 同样记录其在242nm和263nm处的光密度[4]。
按照公式:安定含量=样品的光密度差值/标准对照的光明度差值×标准对照用的安定微克数量/标准对照2mol/升盐酸反提取液的毫升数×样品2mol/升盐酸反提取液的毫升数/样品的含量
2.3 实验结果与讨论
为验证该检验方式的测量效果, 故本文抽取某院一疑似服用安眠药自杀的患者的胃液为实验样本进行实验。所抽取的胃液含量为0.5毫升, 按照上述的实验方式与步骤, 最终测得患者胃液中有安定成分, 且含量为201ug/毫升, 充分证明该方式能有效测量出安眠药中毒样本中的安定含量, 为抢救患者提供重要的支持和依据。
安定是一种中枢神经抑制药物, 其毒性一般比较低, 具有很好的安全性, 因此即便是长时间的少量或适量服用也不会出现明显的中毒现象, 但会出现一系列的毒副作用, 如头昏眼花、记忆力减退、精神疲软等。但安定具有耐受性和依赖性, 很容易形成该药物成瘾, 长期大量的服用会引发慢性中毒的情况。长期服用安定会增加老年痴呆症的患病率, 青少年由于身体发育尚未成熟, 肝、肾排毒代谢的功能整体较弱, 很容易增加深度昏迷或死亡的风险[5]。若安定与酒精一起服用, 将会加剧中毒的反应和症状。
有资料报道, 安定类的药物至少只需要服用20克便可以致人死亡, 但使用安全治疗剂量是虽然不会产生深度睡眠或昏迷, 但会引起意识障碍。如果患者服用超过200片的安定 (以市场常见规格为主) , 就会出现昏迷、血压下降、呼吸困难, 甚至是死亡[6]。因此, 患者及时确诊为安眠药中毒, 并根据其病史、血液检查、尿检的结果, 尽快制定出有效的救治方案是非常重要的。快速检测出患者体内安定含量, 能争取到更多的抢救时间, 为治疗方案的拟定提供更多的数据依据。
本文中所使用的方式操作简单, 能快速测量出安定的含量。但需要注意的是, 一般安眠药中毒样品中, 尤其是胃液中的安定浓度比较大, 需要进行适当的稀释, 或直接减少样本的提取量。文中所提取的0.5毫升的胃液是经过10毫升的2mol/省的盐酸反提取的, 而242nm处的吸光度为0.65, 263nm处的吸光度为0.21。而100μg/毫升的安定标准溶液在242nm处所测得的吸光度为0.504, 在263nm处测得的吸光度为0.140, 根据相关的公式可以推测出患者胃液中的安定含量为201.5μg/毫升。而样品在盐酸提取也中所获得的安定含量为12μg/毫升, 是属于2~20μg/毫升的范围内的。由此可以得出, 该方式是能有效测量出安眠药中毒样本中的安定含量。并且在测试, 要根据具体的情况适当的稀释或减少样品的提取量, 以保证结果的准确性。
3 结语
随着安定药物的广泛使用, 安眠药中毒事件也变得愈加频繁。为病人争取更多的抢救时间, 确定病人安眠药中毒中的安定含量是抢救该类病人的关键所在, 而这些却都要依赖于快速、有效、准确的检测方式。文中所讲述的方式是对紫外分光光度的过程进行了一些改良, 简化了其操作步骤, 让其更具有可操作性。虽然该检验方式不能对中毒样品, 尤其是胃液样品进行直接检测, 需要经过一定的稀释或者减少样品提取量才能使用。但随着我国医药技术的不断发展, 一定能研制出快速检测中毒样品中安定含量的方式, 或者发现能够取代安定且更具有安全性, 对人体影响更小的安眠药物。
摘要：由于误服、过量服用及自杀服食安眠药事件的频繁发生, 因此检验出中毒药品中的安定成分及含量, 对于服用的救治具有重要的意义。本文主要采取紫外分光光度法来检测药品中的安定含量, 并对该方式进行讨论, 探究其在各实验室应用的可能性。
关键词：安眠药,中毒,安定,检测
参考文献
[1] 贾瑜, 张德红, 冯才茂, 马孝斌.安定残留危害及其检测技术研究进展[J].农产品质量与安全, 2012, 02:47-50.
[2] 向甲甲, 刘晓华, 徐刚.苯二氮卓类药物检测方法[J].宁波化工, 2014, 01:6-9.
[3] 黄玉玲.安眠药中毒样品中安定含量的检测[J].现代预防医学, 2006, 12:2435+2440.
[4] 张泽楷, 张明时.恒温-气相色谱法同时测定司法鉴定中的安定和三唑仑[J].分析试验室, 2008, S1:380-382.
[5] 陈建虎.固相萃取/离子阱气相色谱质谱联用对血液中多种安眠药物的同时测定[J].分析测试学报, 2010, 01:84-87.
[6] 张东升, 龚燕, 蔡建荣, 赵晓联.安定检测方法的研究进展[J].饲料工业, 2013, 06:39-41.