胃蛋白酶范文第1篇
1 丝氨酸蛋白酶系列结构特点
1.1 丝氨酸蛋白酶的结构特点
在昆虫中肠中, 丝氨酸蛋白酶 (S e r i n e Proteases, SP) 是一种主要的蛋白酶家族, 它们作为酶类参与各种生理生化途径过程。丝氨酸蛋白酶的作用是断裂大分子蛋白质中的肽键, 使之成为小分子蛋白质。其原理是首先通过邻近的氨基酸残基链激活活性中心的丝氨酸残基, 被激活的羟基与肽键的碳原子发生亲核反应, 从而发生水解反应使得肽键断裂;其次是肽键断裂后, 酰基上的碳被酯化, 肽键的氮端部分被释放游离。在鳞翅目昆虫中肠中, 丝氨酸蛋白酶是一类主要的蛋白酶, 它们是中肠蛋白酶主要的活性成员[8]。丝氨酸蛋白酶在结构上为全β蛋白, 核心结构由2个非常相似的结构域 (N结构域和C结构域) 构成。由于2个结构域在结构上存在着差异, 它们在功能和进化上的作用也就不同。丝氨酸蛋白酶催化中心的3个主要残基中就有2个 (Asp 102&His57) 位于N端结构域, 但是最重要的Ser 195却在C端结构域上, 且其他重要的功能位点都位于C端结构域, 其中包括稳定催化中间产物的氧离子孔 (Gly 193&Ser 195) , 底物特异性口袋 (Ser 189、Gly 216&Gly 226) , 主链底物结合位点 (Ser 214, Trp 215&Gly216) 。C端结构域还含有2个十分重要的保守二硫键, C端结构域上包含了绝大部分的功能位点, 因此C端结构域执行丝氨酸蛋白酶的主要催化功能;而N端结构域的主要功能则可能是同C端结构域配合, 从而保证催化中心三联体的结构稳定和功能活性[9]。
1.2 Clip-domain_SPs、Tryp_SPs的结构特点
Clip-domain_SPs是丝氨酸蛋白酶的一种, 在氨基酸序列中有一个37~55个的基序 (motif) , 这段序列特点是富含半胱氨酸。6个半胱氨酸保守残基在空间结构中形成一个类似2张纸一样的拓扑结构, 因此这类丝氨酸蛋白酶叫做Clip-domain_SPs。类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶 (Trypsin-like serine proteases, Tryp_SPs) 是一类真核生物体中普遍存在的含有胰蛋白酶催化功能域的丝氨酸蛋白酶, 它行使很多包括食物消化、止血、免疫防卫响应和神经响应在内的功能。它们拥有一系列肽活性, 如外肽酶、内肽酶、低聚肽和Ω-肽活性。基于序列相似性和功能关系把SP归为20个家族 (S1~S66) , 通过进化分析发现其中很多属于无根进化关系。不考虑它们的进化起源, 我们发现其中有些肽的分子机制是相似的。胰凝乳蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和羧肽酶C有着相同的活性氨基酸:丝氨酸、天冬氨酸和组氨酸。在生化反应中, 丝氨酸作为亲核基团, 天冬氨酸作为亲电基团, 组氨酸作为一个基本基团, 分别参与到分子过程中去。尽管在分子活性基团有差别, 但是从蛋白分子结构相似上来说仍然有着相似性, 例如在胰凝乳蛋白酶亚家族中的活性三联体是HDS, 在枯草杆菌蛋白酶家族中的活性三联体是DHS, 但在羧肽酶C中活性三联体是SDH。
2 蚊子中的类胰蛋白酶家族的消化研究及其在进化中的作用
2.1 寄主和寄生虫间胰蛋白酶的消化作用
蚊子是传播人类寄生虫病和病毒病的主要媒介, 主要传播疟疾、丝虫病、骨痛热病和黄热热病等, 这些疾病对人类的健康构成了严重的威胁。阻止病原的传播成为控制疾病的重要手段。当前, 人类已经获得冈比亚按蚊、致倦库蚊、埃及伊蚊的基因组数据, 通过这些基因组数据制订相应的措施来研究病虫的传播机制是目前一项热门手段。血液是雌蚊完成生殖成熟周期的重要营养成分, 它促使雌蚊正常产卵和合成卵黄蛋白。因此, 对于血液性寄生害虫的遗传机制的研究有助于控制病虫害的传播。之前的比较基因组学表明这些物种间的相关基因呈现出突出的适应性、动态化和多样化。
丝氨酸蛋白酶在生理过程中扮演着重要的作用:例如对于蛋白前体的活性剪切来激活成活体来行使相应分子功能。类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶是一类真核生物体中普遍存在的含有胰蛋白酶催化功能域的分子, 它行使很多包括食物消化、止血、免疫防卫响应和神经响应在内的功能。在蚊子中, 2类类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶 (胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶) 在食物消化中的生理功能已经被详尽的阐述。冈比亚按蚊基因组中含有7个胰蛋白酶基因, 它们聚类地位于染色体3R一个11 kb大小的区域中, 其中已知5个基因编码功能蛋白。那么血液寄生虫和寄主间, 这类蛋白酶扮演着什么样的功能呢?目前, 人们推测:在寄主体内的寄生虫编码几丁质蛋白, 寄主的丝氨酸蛋白酶通过激活几丁质蛋白来增强中肠围食膜的通透性, 从而使得寄生虫在体内能够运输, 进而提高生存率。通过实验表明, 给蚊子喂食丝氨酸蛋白酶抑制剂后寄生虫生长滞育显著加强, 已经在冈比亚按蚊基因组中发现3个胰凝乳蛋白酶基因。
2.2 蛋白酶的进化研究
2.2.1 遗传中蛋白酶家族大小的变化与进化的关系
人们推测在环境选择压力下基因功能趋于专一化, 那么Tryp_SPc家族在基因家族的成员数量的大小和复杂度上也应该体现增大现象。例如, 在冈比亚按蚊、黑腹果蝇、人和红鳍河豚鱼的蛋白组研究鉴定出Tryp_SPc家族各305, 206, 110, 125个功能基因。相比较而言, 在秀丽隐杆线虫蛋白组中只鉴定出13个Tryp_SPc基因。相对非脊椎动物而言, 脊椎动物的Tryp_SPc蛋白结构更加复杂, 这些蛋白不仅包括Tryp_S P c的功能域, 而且还包括其他的功能域。在功能上, Tryp_SPc家族的大小在各物种起到不同的作用。在非脊椎动物中, 丝氨酸蛋白酶在消化、血淋巴凝固、黑色素形成、抗微生物肽合成起到重要作用, 同时也能激活寄主快速免疫途径。Tryp_SPc在消化系统中的作用很复杂, 扮演着各种各样的角色。
为了解Tryp_SPc的作用 (特别是对血液寄生虫的作用) , 首先要根据物种的基因组序列, 通过生物信息学方法鉴定出所有Tryp_SPc成员, 并在基因组水平上研究蚊子吸血前和吸血后的蛋白酶的含量变化, 进而研究它们的分子复杂性和进化关系。研究发现, 成员增多亚家族成员表达量增加更加显著。冈比亚按蚊、埃及伊蚊、致倦库蚊和黑腹果蝇相比较, Tryp_SPc家族成员数量分别增加32.7%、46%、55%。虽然蚊子和果蝇家族成员大小有很大的区别, 但是蚊子中间的差别更小, 这表明:蚊子种间Tryp_SPc家族成员数量大小和功能从种间分化开始是保守的。进化树表明, 在蚊子的种间分化前有很多成员是共有的, 并在分化过程中形成了很多特有的成员[6] (Wu, Wang et al.2009) 。以上研究表明, Tryp_SPc基因的增加是蚊子进化中的一种适应机制, 并且有可能由获得寄生虫后诱发的机制。
2.2.2 表达水平和在染色体中的分布研究
功能确定的基因趋于复制和拥有更高的进化速率, 基因成员数量和表达量的增加和新的生物学功能相关[10];在动态选择压力下, 功能和进化稳定性之间在遗传上密切相关[11,12]。蚊子吸血过后, Tryp_SPc家族成员组成数量上大体增加, 基因表达水平也提高了。在冈比亚按蚊中, 特有基因在吸血前后, 表达量显著上升。在冈比亚按蚊基因组中Tryp_SPc基因在染色体中是串联聚类, 串联基因复制在Tryp_SPc的增多上有着重要的作用[6]。
2.2.3 蛋白酶的正向选择及三维结构分析
适应性进化中, 有些基因趋向特异基因, 从而使得家族成员增多, 正向选择是这一机制的主要动力。对于吸血之后诱导特异基因和水平显著增加的基因, 计算它们的d N/d S值, 得到比值大于1, 说明Tryp_SPc在进化过程中是正向选择, 进而说明了适应进化使得血液寄生虫能够适应外源血液。
构建三维分子结构发现活性选择性残基在分子结构的表面, 并且包括与丝氨酸蛋白酶抑制剂相结合的活性位点, 因此认为活性选择位点对于Tryp_SPc与血液的消化起着至关重要的作用。
3 Glossina morsitans中CLIP-domain SPs的研究进展
3.1 CLIP-domain SPs在级联反应中的作用
The CLIP-domain SPs参与到昆虫免疫级联反应[13]。在昆虫受到真菌或者细菌感染过程中, CLIP-domain SP Persephone中的活性部分激活CLIP Spatzle途径中酶 (SPE) , SPE激活Pro-Spatzle;前提Spatzle结合到Toll受体, 然后激发Toll途径;Toll受体结合后激活AMP转录, 从而完成级联反应。黑化是另一个昆虫中特有的免疫反应, 一系列的CLIP-domain SPs激发酶原为酚的物质, 形成黑色素后阻止病原的入侵。
3.2 Glossina morsitans中CLIP-domain SPs的鉴定和进化分析
目前, 通过Expressed Sequence Tag (EST) 、基因组和蛋白组技术能够快速地鉴定CLIP-domain SPs的基因。在Glossina morsitans中, 通过生物信息方法找到CLIP-domain SPs的EST后, 同已知物种中的CLIP-domain SPs进行相似性比对和进化分析, 找到了在果蝇中存在并且和免疫相关的Persephone、SPE、Snake、Spirit基因;认为它们可能行使这种分子功能, 然后参与到Glossina morsitans的免疫过程中[14]。
4 讨论
蛋白酶在很多物种中都普遍存在, 起着重要作用。丝氨酸蛋白酶超家族作为蛋白酶, 参与到昆虫生理生化中的各种过程中。随着转录组、基因组和蛋白组的快速建立, 通过生物信息的方法使我们能够快速有效的获得目标基因, 并且研究它们的表达变化。对于已知的基因和蛋白序列进行遗传分析, 能使我们明确分子间的进化关系和进化过程中的机理。在昆虫中, Tryp_SPC和CLIP-domain SPs是丝氨酸超家族中的两大类亚家族, 它们参与到昆虫的食物消化和免疫反应中, 发挥着积极有效的作用。通过对它们分子研究和进化分析, 使得我们能进一步明确它们的功能, 从而为害虫的防治提供了理论依据, 为以后的研究打下了坚实的基础。
摘要：昆虫中肠消化液中含有种类繁杂的蛋白酶, 它们在食物消化、免疫反应等方面发挥着复杂且重要的作用。在昆虫生理过程中, 蛋白代谢的开始阶段, 蛋白酶能水解蛋白质成为多肽, 成为中肠水解蛋白酶。类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶 (Trypsin-like serine proteases, TrypSPs) 是一类真核生物体中普遍存在的含有胰蛋白酶催化功能域的丝氨酸蛋白酶分子, 它行使着很多功能, 如食物消化、止血、免疫防卫响应和神经响应等。
关键词：昆虫,中肠蛋白酶,丝氨酸蛋白酶,类胰蛋白酶,进化,分子遗传学
参考文献
[1] Karumbaiah, L., B.Oppert, Jurat-Fuentes J.L., et al.Analysis of midgut proteinases from Bacillus thuringiensis-susceptible and-resistant Heliothis viresce ns (Lepidoptera:Noctuidae) [J].Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol.2007, 146 (1) :139-146.
[2] Chougule, N.P., E.Doyle, Fitches E., et al.Biochemical characterization of midgut digestive proteases from Mamestra brassicae (cabbage moth;Lepidoptera:Noctuidae) and effect of soybean Kunitz inhibitor (SKTI) in feeding assays[J].J Insect Physiol.2008, 54 (3) :563-572.
[3] Colebatch, G., P.Cooper, East P., cDNA cloning of a salivary chymotrypsin-like protease and the identification of six additional cDNAs encoding putative digestive proteases from the green mirid, Creontiades dilutus (Hemiptera:Miridae) [J].Insect Biochem Mol Biol.2002, 32 (9) :1065-1075.
[4] George, D., N.Ferry, Back E.J., et al.Characterisation of midgut digestive proteases from the maize stem borer Busseola fusca[J].Pest Manag Sci.2008, 64 (11) :1151-1158.
[5] Budatha, M., G.Meur, Dutta-Gupta A.Identification and characterization of midgut proteases in Achaea janata and their implications[J].Biotechnol Lett.2008, 30 (2) :305-310.
[6] Wu, D.D., G.D.Wang, Irwin D.M., et al.A profound role for the expansion of trypsin-like serine protease family in the evolution of hematophagy in mosquito[J].Mol Biol Evol, 2009, 26 (10) :2333-2341.
[7] Telleria, E.L., A.P.de Araujo, Secundino N.F., et al.Trypsin-like serine proteases in Lutzomyia longipalpis-expression, activity and possible modulation by Leishmania infantum chagasi[J].PLoS One, 2010, 5 (5) :e10697.
[8] Patankar, A.G., A.P.Giri, Harsulkar A.M., et al.Complexity in specificities and expression of Helicoverpa armigera gut proteinases explains polyphagous nature of the insect pest[J].Insect Biochem Mol Biol, 2001, 31 (4-5) :453-464.
[9] 季星来, 孙之荣.基于结构的丝氛酸蛋白酶超家族进化分析[J].电子学报, 2001, 29 (12A) :1756-1758.
[10] Lespinet, O., Y.I.Wolf, Koonin EVet, al.The role of lineage-specific gene family expansion in the evolution of eukaryotes[J].Genome Res, 2002, 12 (7) :1048-1059.
[11] Thomas, J.H.Adaptive evolution in two large families of ubiquitin-ligase adapters in nematodes and plants[J].Genome Res, 2006 16 (8) :1017-1030.
[12] Thomas, J.H.Rapid birth-death evolution specific to xenobiotic cytochrome P450 genes in vertebrates[J].PLoS Genet, 2007 3 (5) :e67.
[13] Jiang, H.and M.R.Kanost.The clip-domain family of serine proteinases in arthropods[J].Insect Biochem Mol Biol, 2000, 30 (2) :95-105.
胃蛋白酶范文第2篇
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取该院2014 年1 月—2015 年6 月收治的老年糖尿病患者60 例作为观察组。 其中男32 例,女28 例,年龄53~75 岁,平均年龄(63.2±4.8)岁。 选择同期来该院健康体检的60 例人员作为对照组,其中男34 例,女26 例,年龄51~73 岁,平均年龄(65.3±4.6)岁。 所有患者均无糖尿病合并症及药物过敏史,且对该研究均知情,并签署同意书。 两组患者在年龄、 性别等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法
在所有患者处于空腹及静息的状态下, 采集两组患者晨起后的首次小便尿液,作为尿液标本,并利用免疫学实验法检测所得标本。 检测对照组及治疗组患者的 β2 微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G含量,统计两组人员阳性检出率。
1.3 诊断标准
临床检查蛋白尿的诊断标准为:尿液中尿 β2 微球蛋白含量≤154 μg/L,免疫球蛋白G含量≤5.45 g/L,尿蛋白含量≤14.8 mg/L, 若检测结果显示高于正常值范围,为检查阳性。
1.4 统计方法
数据均用统计软件SPSS19.0 处理分析, 计量资料用(±s)表示,采用t检验,计数资料用n(%)表示,行 χ2检验,P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者 β2 微球蛋白、 尿白蛋白及免疫球蛋白G检出率对比
检测结果显示,对照组健康体检人员的 β2 微球蛋白、 尿白蛋白及免疫球蛋白G阳性检出率分别为5.0% 、15.0% 、10.0% , 低于观察组患者73.3% 、61.7% 、66.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。 见表1。
注:与对照组比较,*P<0.05。
2.2 两组患者 β2 微球蛋白、 尿白蛋白及免疫球蛋白G检测含量对比
检测结果表明, 对照组健康人员 β2 微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G检测含量低于观察组, 差异有统计学意义(P<0.05)。 见表2。
3 讨论
糖尿病是由多种病因导致的以慢性高血糖为特征的终身性代谢疾病。 患者因长期血糖偏高,对其心、脑、肾、眼睛、足及周围神经具有一定的损伤,严重危害患者的身心健康及生命安全。 而环境因素和遗传因素等因素共同作用是造成糖尿病病发的主要原因[5]。 胰岛 β细胞分泌与合成胰岛素, 经血循环到达患者体内的各器官组织的靶细胞与特意性受体结合, 增强细胞内物质代谢作用, 若整个作用过程中任意一个环节出现异常均会引发糖尿病[6]。 且当患者病情应激或加重时,易引发严重的急性代谢紊乱症状, 可对患者的肾脏造成不可逆性损伤,病发率与致死率高。 故及早发现糖尿病病症,及时诊断并给予对症治疗,对控制糖尿病的发生与发展至关重要[7,8]。
代谢紊乱症状群是老年糖尿病患者的主要临床表现,伴有视力模糊、肢体无力及皮肤瘙痒等症状。 因传统检测的血糖值常为瞬间血糖状态, 故临床诊断需检测患者的静脉血浆,操作不便。 该研究采集糖尿病患者及健康体检人员的尿液标本,检测尿液中的 β2 微球蛋白、 尿白蛋白及免疫球蛋白G含量含量。 检测结果显示,对照组健康体检人员的 β2 微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G阳性检出率与含量均低于观察组, 差异有统计学意义(P<0.05)。 结果说明检测患者的尿蛋白含量,可为患者治疗提供依据,利于患者治疗。
综上所述,检测老年的糖尿病患者的尿白蛋白、免疫球蛋白G及 β2 微球蛋白, 可作为临床诊断治疗糖尿病患者的指标,结果可靠,操作简便,值得临床推广使用。
摘要：目的 探讨检测尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白对治疗老年糖尿病患者的临床意义。方法 选取该院2014年1月—2015年6月收治的老年糖尿病患者60例设成观察组,选择同期来该院健康体检的60例人员设成对照组。检测两组患者的尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白,比较检测含量及阳性检出率。结果 对照组人员的β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G检测含量低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组的β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G阳性检出率分别为5.0%、15.0%、10.0%,低于观察组患者的73.3%、61.7%、66.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 β2微球蛋白、尿白蛋白及免疫球蛋白G的含量检测及阳性检出率结果,可为临床诊断治疗老年糖尿病患者提供依据,具有一定的临床意义。
关键词：尿白蛋白,免疫球蛋白G,β2微球蛋白,老年糖尿病
参考文献
[1] 孔爱菊.尿白蛋白、免疫球蛋白G及β2微球蛋白检测在老年糖尿病患者的临床意义[J].中国实用医刊,2015,42(19):95-96.
[2] 谢岚,毛欣.Cys C与β2-MG联合检测诊断老年糖尿病早期肾病的意义[J].现代临床医学,2013,39(1):8-10.
[3] 王金英.血清C反应蛋白对老年糖尿病合并脑梗死患者的检测价值[J].中国实用医药,2015,10(27):23-24.
[4] 李艳萍.血清胱抑素C、尿微量蛋白联合检测在2型糖尿病肾损害早期诊断中的临床价值[J].中国实用医刊,2015,42(9):110-111.
[5] 代丽娟,朱晓明,宋立群.胃肾养阴汤对糖尿病肾病Ⅲ期气阴两虚型患者UACR、UAER、尿β2-MG、hs-CRP的影响[J].中医药学报,2015,31(3):111-113.
[6] 薄利红.106例高血压和糖尿病患者尿微量白蛋白和尿β2微球蛋白的检测结果分析[J].中国医药指南,2015,13(34):32-33.
[7] 代喆,徐焱成.血清胱抑素C与β2微球蛋白对2型糖尿病患者微量白蛋白尿的诊断和评估[J].中日友好医院学报,2015,29(6):342-345.
胃蛋白酶范文第3篇
1 资料与方法
1.1 一般资料
我院2008年11月至2009年11月消化内镜室行结肠镜检查病人患者, 共发现结直肠腺瘤61例, 其中男31例, 女30例。年龄范围7～82岁, 平均46.5岁。全部病例均按结肠镜检查常规准备, 应用奥林帕斯-240、潘太克斯3500电子结肠镜进行检查。腺瘤部位和大小、形态以内镜下描述为准。其中结肠腺瘤35例, 直肠腺瘤26例。内镜下电切或活检的结直肠病理组织标本由2位高年资病理医师进行诊断与分型。腺瘤组织学类型如下:管状腺瘤33例、混合性腺瘤15例、绒毛状腺瘤例12例, 锯齿状腺瘤1例。其中非不典型增生36例, 不典型增生22例, 早期癌变3例。
1.2 方法
1.2.1 标本处理
组织标本均常规经10%中性福尔马林溶液固定, 酒精脱水, 二甲苯透明, 石蜡包埋, 做4μm连续切片。每例取8张连续切片, 其中2张用于HE染色进行病理分型, 其余6张分别用于钙卫蛋白和钙激活蛋白免疫组化染色。
1.2.2 主要组化试剂及方法
羊抗人钙激活蛋白多克隆抗体 (Santa Cruz公司, 美国) , SABC (链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物) 免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。免疫组化采用SABC法进行。鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体购自Thermo公司, 免疫组化试剂盒购自天津市津脉基因测绘技术有限公司。采取链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色方法 (S-P法) 检测钙卫蛋白的表达。
1.3 Cap43的定量分析及结果判定
钙卫蛋白结果判定:采取已知的阳性切片作阳性对照, 用PBS液代替一抗作为阴性对照。细胞浆或胞膜染色强度判定:不着色 (-) ;浅棕黄色 (+) ;棕黄色 (++) ;棕褐色 (+++) 。+—+++细胞数>15%为阳性表达, <15%为阴性表达。
钙激活蛋白结果判定:阳性对照采用钙激活蛋白高表达的小鼠肾脏作为对照;空白对照用PBS代替特异性一抗。细胞浆或胞膜染色强度判定:不着色 (-) ;浅棕黄色 (+) ;棕黄色 (++) ;棕褐色 (+++) 。+—+++细胞数>5%为阳性表达, <5%为阴性表达。
1.4 统计学处理
用SPSS 11.5软件包对所得结果进行χ2检验或Fisher精确概率检验, 以P=0.05为检验水准。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直腺瘤组织中的表达及与各病理因素之间的关系
钙卫蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关 (P>0.05) 。3种病理异型组织的表达差异存在差异, 非癌变组 (非不典型增生加不典型增生) 阳性表达率要明显低于癌变组, 但其差异无统计学意义 (χ2=5.539, P=0.063) 。钙激活蛋白的表达同样与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关 (P>0.05) 。但不同病理异型性组织的钙激活蛋白表达率之间的差异具有统计学意义 (χ2=7.882, P=0.019) , 与非不典型增生和不典型增生组织相比较, 早期癌变组织钙激活蛋白表达率明显降低, 见表1。
2.2 钙卫蛋白、钙激活蛋白表达之间的关联性
对同一组织标本同时进行钙激活蛋白及钙卫蛋白的表达情况分布如表2所示。统计显示2种蛋白表达关联系数r=-0.104, 关联无统计学意义 (P=0.425) 。
3 讨论
钙卫蛋白是中性粒细胞和巨噬细胞胞浆来源的含钙蛋白, 主要来源于中性粒细胞和单核细胞, 具有多种生物学功能, 在许多炎症情况下含量增加, 可作为急性炎症性标志物。有研究显示在结直肠癌中, 粪便钙卫蛋白的含量明显升高[2]。钙激活蛋白 (calcium actived protein, Cap43) 基因又名N-myc下游调节基因, 是美国学者Salnikow在研究镍的致癌机理中发现的新基因[3]。被认为在多种类型的肿瘤中可作为有效的诊治指标[4]。在我们的前期研究中对结直肠癌组织中钙激活蛋白、钙卫蛋白表达进行检测发现2种蛋白的表达与结直肠癌患者的性别、部位及癌组织病理类型、分化程度均无关。但2种蛋白在结直肠正常组织、腺瘤组织和癌组织中表达水平存在着明显差异。钙激活蛋白在结直肠癌组织的表达显著低于结直肠正常组织和腺瘤组织, 于此相反, 钙卫蛋白在结直肠癌组织的表达显著高于结直肠正常组织和腺瘤组织, 并且其实际表达于结直肠癌组织中的间质细胞, 主要位于中性粒细胞的胞质中[5,6,7]。本次我们检测对比了结肠腺瘤中2种蛋白的表达, 发现2种蛋白的表达与均与结直肠腺瘤患者的性别、部位及组织病理类型无关。但与腺瘤的病理异型性有着密切相关性。发生早期癌变的组织中钙卫蛋白表达率明显升高, 而钙激活蛋白表达率显著下降, 这种变化趋势与它们在结直肠良恶性肿瘤表达的差异是一致的。提示在腺瘤癌变的早期已经出现钙卫蛋白及钙激活蛋白表达的异常, 钙卫蛋白的高表达及钙激活蛋白的低表达可成为早期预测腺瘤癌变的的分子生物学指标。
钙卫蛋白由两条重链14和一条轻链8非共价结合形成异二聚体, 每条链可结合2个钙离子, 在钙离子存在的情况下具有抗蛋白酶活性, 在肠腔和外界环境中长期保持稳定, 不被各种酶和细菌破坏。Salnikow[3]等研究镍化合物产生cap43过程中发现, 游离钙离子载体A23187刺激cap43基因的大量表达, 提示细胞内游离钙离子升高是诱导cap43基因表达的重要原因。作为同样与钙离子相关的蛋白, 推测可能存在某种关联, 但我们的研究表明, 虽然它们在腺瘤的癌变中表现了相反的变化趋势, 但这种变化不存在关联性。
摘要：目的 探讨钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直肠腺瘤组织中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学法对结直肠腺瘤组织标本中钙卫蛋白、钙激活蛋白的表达进行检测。结果 钙卫蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关 (P>0.05) 。钙激活蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关 (P>0.05) 。但不同病理异型性之间的差异具有统计学意义 (χ2=7.882, P=0.019) 。钙卫蛋白和钙激活蛋白表达无关联 (r=-0.104) 。结论 钙卫蛋白的高表达及钙激活蛋白的低表达可成为早期预测腺瘤癌变的的分子生物学指标。
关键词：钙卫蛋白,钙激活蛋白,结直肠腺瘤,免疫组织化学
参考文献
[1] 陈灏珠等.实用内科学[M].第12版.北京:人民卫生出版社, 2005:1934.
[2] Hoff G, Grotmol T, Thiis-Evensen E, et al.Testing fo faecal calprotectin (PhiCal) in the Norwegian Colorectal Cancer Pre-vention trial on flexible sigmoidoscopy screening:comparison with an immunochemical test for occult blood (FlexSure OBT) [J].Gut2004, 53:1329～1333.
[3] Salnikow K, Blagosklonny MV, Ryan H, et al.Carcinogenic nickel induces genes involved with hypoxic stress[J].Cancer Res, 2000, 60 (1) :38～41.
[4] 庄利萍, 薛喜筠, 高倩, 等.NDRG1基因与肿瘤的研究进展[J].实用癌症杂志, 2009, 24 (3) :211～212.
[5] 秦宝山, 马应杰, 王水红.钙卫蛋白在大肠癌中的表达及意义[J].胃肠病学和肝脏病学杂志, 2010, 19 (12) :1081～1083.
[6] 王水红, 马应杰.大肠癌组织中Cap43蛋白的表达变化及意义[J].山东医药, 2010, 50 (6) :55～56.
胃蛋白酶范文第4篇
原标题：激活红色基因 焕发生机活力
——强卫作风建设党课报告精彩摘登
今视网5月13日南昌讯(记者良保)5月13日，省委召开开展“三大工程”、深入推进第二批教育实践活动视频会议，省委书记强卫作了题为《激活红色基因焕发生机活力》的作风建设党课报告。本网现将强卫书记报告中的精彩内容摘要刊登，以飨网友。
讲话脉络
总书记指出，要让红色基因代代相传
前不久，总书记在新疆军区某红军师考察工作时指出，要把红色基因融入官兵血脉，让红色基因代代相传。总书记关于红色基因的重要论述，给我们以深刻的启迪和教诲。
江西红色基因是中国共产党革命精神的源头
江西作为著名的革命老区，为中国革命胜利作出了重大贡献，在中国共产党历史上具有重要地位。在艰苦卓绝的革命斗争中，这片红土地上产生了伟大的井冈山精神、苏区精神和苏区干部好作风等一系列宝贵的精神财富，为我们党孕育和发展红色基因作出了突出贡献。党和国家的一系列伟大精神都传承了江西红土地上的红色基因并赋予了新的时代内涵，成为我们党的宝贵精神财富。江西红色基因，是中国共产党革命精神的源头。
江西红色基因基本内涵
信念坚定，纪律严明。信念坚定是共产党人的政治灵魂，纪律严明是共产党人的高度自觉。
对党忠诚，一心为民。永远忠诚党、忠诚人民，忠诚共产主义事业，是共产党人的政治本色。群众路线是党的生命线和根本工作路线。
艰苦奋斗，勇于牺牲。一不怕苦、二不怕死的革命精神，是共产党人独有的标识，铸就了我们的党魂和军魂。
实事求是，勇闯新路。一切从实际出发，是马克思主义的精髓，也是共产党人不断取得胜利的法宝。
清正廉洁，无私奉献。清廉与奉献，是共产党人应有的政治品格，是党的先进性和纯洁性的重要体现。
新时代需要激活红色基因
激活红色基因，就是要把党的光荣传统、优良作风，与我们正在进行的奋斗相结合，让党的宝贵精神财富彰显出新的时代价值。当前，我们党所处的历史方位发生了重大变化，担负的历史任务无比繁重，面临的历史考验更加严峻。党提高战斗力、增强免疫力、强化创新力，顺利完成好时代赋予的使命，不负人民的重托，就必须激活红色基因，努力把自身锻造成为团结和谐、富有活力、勇于进取、敢于担当的坚强集体。
三大工程是我省激活红色基因的具体抓手
省委作出决定，在全省开展“连心、强基、模范”三大工程，这是我省深入推进第二批活动、激活红色基因的具体抓手。主要目的就是激活红色基因，让党的光荣传统接力传递下去，使广大党员干部始终满怀激情、满怀信心、满怀斗志，始终昂扬向上、奋发有为、一往无前，永葆为民务实清廉的价值追求。
争做红色基因的传承者争做“四有”好党员好干部
红土地孕育了红色基因，江西人的血液里流淌着红色基因。我们不仅要为拥有光荣革命传统而骄傲自豪，更要为传承、弘扬红色基因而不懈努力。全省各级党员干部以焦裕禄、龚全珍等先进模范人物为标杆，自觉参与到“连心、强基、模范”三大工程中来，争做红色基因的传承者，争做有信仰、有担当、有情怀、有气节的好党员、好干部。
精彩观点
党的肌体中流淌着“先进血液”
正是因为自身的先进性，红色基因从我们党诞生起就植根于党的肌体中。这就从本质上规定了我们党是中国共产党，而不是其他什么政党;党领导的军队是人民军队，而不是其他什么性质的军队。就像一个人体内流淌的有A型血、B型血、O型血一样，我们党的肌体中流淌的就是科学、为民、无私、高尚的“先进血液”。
让党的宝贵精神财富彰显出新的时代价值
大家知道，生物学意义上的激活基因，是指通过改变基因排序等技术手段，优化生物原有的遗传特性，使之焕发出新的活力。同样，激活红色基因，就是要把党的光荣传统、优良作风，与我们正在进行的奋斗相结合，让党的宝贵精神财富彰显出新的时代价值。
新时期更要建设“铁军”
“加强纪律性，革命无不胜。”过去，我们靠铁的纪律打败了敌人。新的历史条件下，更要上下同心、步调一致、统一行动，使我们党成为一支“铁军”，使组织的力量倍增。唯有如此，才能更好地带领人民群众前进，完成“两个一百年”目标、实现民族复兴中国梦。
思想政治教育活动纯洁了党
激活红色基因，我们党有许多行之有效的成功经验，其中重要的一条就是高度重视思想政治教育。从井冈山斗争时期到延安时期，从建国之初的社会主义建设时期到十一届三中全会以来的改革开放时期，我们党总是结合实际需要开展思想政治教育，纯洁党的肌体，净化党的队伍，努力保持党的先进性和纯洁性。
做群众工作不能三天打鱼两天晒网
以前有句顺口溜，“雷锋叔叔没户口，三月来了四月走。”这是群众对运动式工作方法的讽刺。我们决不能刮一阵风、搞运动，三天打鱼两天晒网，集中抓的时候雷霆万钧，平时放任自流，而是要经常抓、抓经常，把已经采取的措施、形成的机制扎根落地，做到有章必循、违规必究，把服务群众工作坚持不懈抓下去。
把群众的难事当作家事来办
要更加耐心和细心，把群众的委屈当作家人的委屈来倾听，把群众的难事当作家事来办，对群众的普遍愿望和合理诉求，明确工作责任、整改时限，不推诿、不拖延、不畏难，抓铁留痕，务求必成，让群众真正感到苏区干部好作风又回来了。
组织力是社会主义最大优越性的根本保障
社会主义的最大优越性是集中力量办大事，也是因为我们形成了从上到下的组织体系，只要党有号召，各级层层动员，基层立即行动，凝聚了攻坚克难的磅礴力量。所以说，高度重视基层，着力打牢根基，始终是我们党的一条宝贵经验。
像央视评选“十大感动人物”那样评选“龚全珍式好干部”
要面向全省集中推选一批“龚全珍式好干部”，注意广泛发动群众参与，让群众来推举、鉴别、评判，就像中央电视台评选“十大感动人物”、“最美人物”那样，使推出的典型为群众所公认，具有广泛而深厚的群众基础。
立志做大事，而不是立志做大官
要志存高远，胸怀大局，以“天下兴亡、匹夫有责”的无私情怀，立志做大事，而不是立志做大官，把全部心思用在党的事业上，用在为民造福上。特别是在党和人民需要的关键时刻，要豁得出来、顶得上去，真正成为带领人民群众战风险、渡难关的主心骨，用实际行动展现对党的信仰、对人民的忠诚。
把自己摆进去学习先进
我过去多次观看电影《焦裕禄》，最近省四套班子成员又集中看了一遍，每一次看感受都不一样。过去看的时候，更多的是为他的高尚品格所感动，感到他是个好人、好官。现在作为领导干部看的时候，我把自己摆进去，一一对照焦裕禄的言行、举止，对照焦裕禄的事迹和精神体会更深了，尤其是焦裕禄把改变兰考的责任担在肩上，对我们从政为官者有很深的教育和启发。
群众满意是衡量一切工作的最高标准
常有干部说，我们一天忙到晚，花了很多精力、干了很多事，可是群众还是不满意。为什么?我想，这里有一个标准问题。我们讲自己多累多辛苦、干了多少工作，这是自我标准，不是群众标准，群众满意才是衡量一切工作的最高标准。
当人民的“勤务员”做百姓的“遮阳伞”
我们要时刻牢记，人民群众对美好生活的向往就是我们的奋斗目标，我们要俯下身子去当人民的“勤务员”，张开双臂去做百姓的“遮阳伞”，用实效赢得群众信任，用实干为群众谋利益。
共产党员理应成为顶天立地的大丈夫
现在，党员干部面临的诱惑确实多了，能不能做到“敌军围困千万重，我自岿然不动”，是对我们思想品格、人生境界的考验。孟子说，“富贵不能淫，贫贱不能移，威武不能屈，此之谓大丈夫。”我们共产党员理应成为这种顶天立地的大丈夫。
在廉洁从政中收获健康、感受快乐、体验幸福
胃蛋白酶范文第5篇
1 资料与方法
1.1 一般资料
仪器:OLYMPu S AU400全自动生化分析仪、HLC-723G7高效液相色谱分析仪。样本采集:已被临床确诊糖尿病的60例患者, 采集空腹血各5m L;确诊患者均无糖尿病、肾病以及心血管疾病的健康人, 采集空腹血各5m L。年龄较大的糖尿病患者, 在采集样本做对照组时, 尽量选择与患病组年龄相仿的人群, 年龄48~78岁为糖尿病组, 其中女28例、男32例;年龄45~76岁为对照组, 其中女30名、男30名。样本采集完及时离心分离血清并置-70℃冰箱冷冻保存。
1.2 方法
常规血脂项目分析:用OLYMPUS AU400全自动生化分析仪和Roche公司试剂分析;Hb Alc:采用高压液相色谱法测定。
1.3 统计学方法
采用SPSS 12.0统计学软件进行统计学分析, 所有计量资料用 (x-±s) 表示, 2组疗效比较采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
(1) 糖尿病组和对照组LDL结果:糖尿病组LDL测定结果为104.34 (27.8~273.64) , 明显高于对照组38.45 (7.9~67.5) (P<0.05) 。 (2) 糖尿病组和对照组血糖及常规血脂结果:糖尿病组和对照组的LDL、Hb A1c、血糖、TG和Chol水平明显高于对照组 (P<0.05) ;HDL水平低于对照组 (P<0.05) 。 (3) 糖尿病组LDL与血糖、Hb Alc及LDL相关性分析:糖尿病组Hb A1c水平为10.42%±1.69%。糖尿病患者LDL升高与血糖水平有关。另外, Hb Alc与LDL无明显关系, 因此, Hb A1c水平与LDL水平无关。
3 讨论
本研究显示糖尿病患者LDL明显高于对照组, 同时血糖、TG、Chol水平增高。在高血糖和高血脂存在的情况下, 血液中高浓度存在的葡萄糖醛基与脂蛋白中载脂蛋白上的赖氨酸残基N端结合, 形成糖化脂蛋白。糖化主要发生在apo B100上。而apo B100主要存在于LDL, 本研究结果也证实了糖尿病患者存在高浓度的LDL。
对冠心病患者和糖尿病患者的LDL进行研究, 发现2组患者都有LDL升高的现象。LDL可能在以下几个方面和动脉粥样硬化有关: (1) LDL能刺激血管内皮细胞, 表达细胞间黏附分子-1 (ICAM-1) 、单核细胞趋化蛋白质。1 (MCP-1) 及巨噬细胞克隆刺激因子 (M-CSF) 。这些因子促进单核细胞分化、趋化进入内皮下层与内皮细胞结合, 使冠状动脉脂纹的形成加快; (2) 动脉粥样硬化形成的关键在于平滑肌细胞增生及转变成泡沫细胞。以上证实LDL可直接刺激平滑肌细胞增生并促使平滑肌细胞转变成泡沫细胞, 也可通过抑制NO的合成和释放间接促进平滑肌细胞增生。LDL和动脉粥样硬化的关系表现在两方面:一方面由于LDL被糖化, 更容易被氧化形成OX-LDL。另一方面LDL和OX-LDL同属于修饰的脂蛋白, 促使动脉粥样硬化方面和LDL有相同作用。在研究领域, 有关LDL的研究很少, 本实验对LDL的研究有望成为糖尿病并发冠心病的研究热点。
对糖尿病患者LDL的形成研究结果表明, LDL的形成和血糖浓度呈正相关, 结果证实LDL水平和Hb A1c水平无关, 本研究假设两者水平变化一致, 但得出结果实验相反, 究其原因可能在于两者在糖化过程中存在一定的差异。本研究显示糖尿病患者存在明显的代谢紊乱, 表现在血糖升高、脂代谢异紊乱、脂质糖化明显, 且糖化程度和血糖水平相关。据此认为:糖尿病患者脂质糖化是并发冠心病的重要危险因素, LDL有望成为评价糖尿病并发冠心病的生化指标。
摘要：目的 分析糖尿病患者糖化血红蛋白 (HbA1c) 以及低密度脂蛋白 (LDL) 水平, 探讨糖尿病患者LDL与冠心病的关系。方法 检测60例糖尿病患者及60名健康人群的LDL, 糖尿病组同时测定HbA1c。结果 糖尿病组LDL和HbA1c与对照组比较无差异 (P>0.05) ;LDL和HbA1c水平明显高于对照组 (P<0.05) ;糖尿病组LDL与血糖浓度呈正相关关系 (r=0.636, P<0.05) , 与HbAIc不相关 (r=0.331, r=0.327, P>0.05) 。结论 糖尿病患者LDL明显升高, 脂质糖化是糖尿病患者发生冠心病的危险因素, LDL将成为评价糖尿病患者并发冠心病的生化指标。
关键词：糖化低密度脂蛋白,糖尿病,冠心病,血脂
参考文献
[1] 朱永芳, 李红, 闻碧玛.老年2型糖尿病患者血脂及糖化血红蛋白水平的分析[J].现代医学, 2008 (4) .
[2] 张扬, 冉建民.血糖控制对2型糖尿病患者载脂蛋白A水平的影响[J].热带医学杂志, 2008 (7) .
[3] 郭海阁.2型糖尿病患者糖化血红蛋白与血糖血脂水平的相关性分析[J].中国误诊学杂志, 2010 (16) .
[4] 张具仓.2型糖尿病患者大血管病变及相关危险因素分析[D].兰州:兰州大学, 2006.