硒是1817年瑞典学者Berzelius发现的一种元素[1], 人和动物如果吃了富含高含硒量的水和食物后, 就会引起中毒和死亡。有实验表明人体的生长发育离不开硒元素, 硒元素在有机体体内的物质能量代谢中发挥着重要作用。富硒植物有大蒜、洋葱等, 大蒜是天然的含硒植物。国际标准方法的测定原理是, 硒是以Se6+存在于动植物体内, , 将样品酸化, , 然后Se6+氧化为Se4+, 进行荧光强度测定。
用荧光分光光度法测定大蒜中硒含量, 方法快速、简便、准确。
1 材料和方法
1.1 供试材料大蒜购于沈阳某超市, 原料质量合格, 中间不会引入杂质, 影响金属含量。
1.2仪器与试剂AFS-2202型原子荧光光度计 (天津吉天仪器有限公司) ;硒标准工作液 (1μg/m L) ;硒标准储备液 (100μg/m L) ;所用试剂均为优级纯。
1.3 样品制备大蒜去皮, 清洗干净, 去除水滴, 搅拌打成均匀浆液。
1.4硒含量的测定称取大蒜试样0.5~2.0g, 置于250m L三角烧瓶或高脚烧杯中, 加10.0 m L混合酸 (将硝酸与高氯酸按9:1体积混合) , 静置12小时。在电热板上加热, 滴加硝酸到溶液中, 当溶液变为无色并且出现白烟时.将剩余溶液加热至2m L左右, 冷却, 再加1:1的盐酸溶液5.0m L, 在电热板上继续加热, 溶液变为无色并且出现白烟。, 然后Se6+氧化为Se4+。冷却, 将溶液转移至50 m L容量瓶中。加盐酸10.0 m L和铁氰化钾溶液6.0m L, 定容混匀待测。做空白试验。
计算公式:硒的含量 (m g/kg) = (C1-C2) VD/1000m
式中, C1为试样测定浓度 (μg/L) ;C2为试样空白测定浓度 (μg/L) ;V为试样定容体积 (m L) ;D为分取倍数;m为试样质量 (g) 。
1.5硒标准曲线的绘制分别吸取硒标准工作液0、2.50 m L于50 m L容量瓶中。加盐酸10.0 m L和铁氰化钾溶液6.0 m L, 定容混匀待测。设定标准曲线的浓度范围:0、5.00、10.00、20.00、30.00、40.00、50.00μg/L。仪器条件:负高压300V;灯电流80m A;载气流量300m L/min;屏蔽气流量600m L/min;原子化高度6min;测量方式为标准曲线法;读数方式为峰面积;延迟时间1.5s;读数时间8s。
2 结果与分析
2.1硒标准曲线的线性范围50.0μg/L硒标准溶液作为最高浓度, 将0μg/L硒标准溶液作为标准空白, 把, , 以荧光强度值 (I) 对硒浓度值 (C) 进行回归, 得到回归方程:I=19.848C+10.583, 相关系数R=0.9994。
2.2 样品测定结果
计算方法:将测定的荧光强度结果代入得到的标准曲线方程中, 计算硒含量。结果见表1。
3结语因为荧光强度变化很快, 为避免由于荧光强度随时间延长而导致含量减低, 应该尽快进行检测, 同时对反应过程中p H的调节也要准确。另外, 研究表明普通市售大蒜中含硒量很低, 我们还需要进一步对含硒量丰富的大蒜进行功能性研究。
摘要：用原子荧光分光光度法测定大蒜样品中的硒含量, 按照国家法定标准中的食物中硒的含量进行测定。大蒜中硒含量浓度在一定范围内与其荧光强度呈线性关系, 相关系数为0.9994, 硒平均含量0.0329μg/g。结果表明此方法可靠, 重现性好。
关键词：硒,大蒜,原子荧光分光光度法
参考文献
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[4] 段咏新, 傅庭治.大蒜对硒的吸收及硒对大蒜生长的影响[J].广东微量元素科学, 1997, 4 (11) :52-55.